L'hepatitis C és una infecció del fetge causada pel virus del VHC Flaviviridae, que consta d'una o més molècules d'ARN. Per regla general, es prenen una sèrie de mesures diagnòstiques per establir en un pacient l'hepatitis C. La PCR és una anàlisi que confirma el diagnòstic amb precisió. Sovint, la conclusió la donen els metges quan el pacient ja té els primers signes de la mal altia.
Què és l'hepatitis C
El dany hepàtic per una infecció vírica transmesa per sang o per contacte sexual s'anomena hepatitis C en medicina. L'agent causant és un virus que conté ARN d'agents infecciosos no cel·lulars de la família Flaviviridae. La infecció pot romandre al cos durant molt de temps sense mostrar-se. Per tant, només quan es detecta un microorganisme mitjançant una anàlisi de sang amb ARN de PCR, l'hepatitis C (com a diagnòstic) es considera justificada.
El flavivirus no es produeix en cèl·lules aïllades cultivades artificialment. En el procés de reproducció, l'agent infecciós crea modificacions immunològicament diferents. Aquests factors impedeixen que el cos doniresposta protectora adequada i els experts tenen dificultats per desenvolupar una vacuna eficaç.
El virus es transmet per via parenteral. Per a la infecció, ha d'entrar en quantitats suficients directament al torrent sanguini.
Quines proves es fan per a l'hepatitis C
Les patologies víriques del fetge es diagnostiquen mitjançant proves de laboratori. Els estudis clínics de l'hepatitis C es porten a terme mitjançant l'estudi d'antígens o compostos proteics (anticossos) estranys i perillosos en el biomaterial del pacient, principalment a la sang.
- Inmunoassaig enzimàtic (ELISA). El mètode es basa en la detecció d'anticossos lgM a la sang. La immunoglobulina es considera la més gran i és un pentàmer. Es manifesta en la resposta protectora primària dels limfòcits a una substància estranya desconeguda.
- Radioimmunoassay (RIA): determinació quantitativa de la immunoglobulina lgM mitjançant un isòtop radioactiu de iode marcat.
- PCR de l'hepatitis C - determinació de l'ARN viral en el biomaterial (sang). Aquesta anàlisi confirma de manera fiable el diagnòstic.
Les proves de IgG no són fiables. La seva presència al sèrum sanguini pot indicar no només la presència d'un flavivirus, sinó també una altra infecció passada que té el mateix patogen.
El que determina l'anàlisi de PCR
La reacció en cadena de la polimerasa (PCR) es basa en la identificació de regions d'ADN específiques per a determinats patògens en mostres de material per a la investigació (epiteli, sang). L'anàlisi permet identificar els organismes més petits (virus) patògens detectant el seu ARN o ADN en material biològic.
El procediment de laboratori per a la detecció d'anticossos La PCR de l'hepatitis C es realitza en 3 etapes:
- Seleccioneu. El biomaterial estudiat es purifica de les impureses i s'obté ADN en la fase mòbil de la columna cromatogràfica.
- Amplificació. L'anàlisi es realitza al ciclador dispositiu-termostat. Escalfa i refreda les provetes amb una certa ciclicitat. Per a un estudi, es realitzen fins a 35 cicles. El resultat és un nombre suficient de fragments d'ADN per detectar, identificar i avaluar el patogen.
- Electroforesi. Els fragments resultants es col·loquen en un gel amb diferent saturació d'agarosa i es realitza l'electroforesi. L'electroferograma resultant s'analitza en un ordinador.
No només s'utilitza l'estudi de PCR estàndard, sinó també l'anàlisi de PCR en temps real. Aquest és un diagnòstic en temps real. El mètode permet una anàlisi qualitativa i quantitativa, que permet identificar la formació i la dinàmica de la mal altia, així com prescriure una teràpia destinada a eliminar la causa de l'origen de la patologia. La PCR en temps real també s'utilitza per determinar un cultiu pur d'agents infecciosos (genotipat).
Com es fa la prova de reacció en cadena de la polimerasa
Per al diagnòstic, es pot utilitzar qualsevol fluid biològic humà. El biomaterial per analitzar l'hepatitis C sol ser sang.
El mostreig per al diagnòstic es realitza en el procedimentoficina. Per prendre sang, utilitzeu tubs d'assaig d'un sol ús amb una substància que inhibeix la coagulació de la sang. Les activitats enfocades a prevenir la propagació d'agents infecciosos ajuden a evitar l'entrada d'una altra soca de microorganismes des de l'exterior.
La sang per a la PCR de l'hepatitis C es pren al matí amb l'estómac buit. La mostra s'envia immediatament al laboratori. Es permet emmagatzemar el biomaterial a una temperatura de +4 a +8 graus centígrads. Els contenidors estan etiquetats i proveïts d'instruccions. Els resultats de les proves estan disponibles en 48 hores, de vegades abans.
Tipus de PCR
L'àmbit d'aplicació de la reacció en cadena de la polimerasa és força ampli. Els infecciosos determinen mitjançant PCR l'hepatitis B, les mal alties transmeses per insectes xucladors de sang, la sida, la tuberculosi. En oncologia, amb aquest mètode, les cèl·lules tumorals es detecten en una fase primerenca.
Hi ha uns catorze tipus d'anàlisi. L'ús d'un o altre tipus depèn de l'abast i dels resultats finals de les anàlisis. Alguns tipus de PCR són indispensables quan el resultat es necessita en 20 minuts.
Per diagnosticar l'hepatitis C, s'utilitzen 3 tipus de reacció en cadena de la polimerasa:
- La valoració qualitativa pot ser positiva, que indica la presència d'una infecció al cos, o negativa, que indica l'absència d'un flavivirus.
- PCR en temps real (anàlisi quantitativa): determina l'ARN quantitatiu del patogen en UI/ml.
- El genotip és una anàlisi que revela el tipus (genotip) del virus.
Per identificar i determinar amb precisió la mal altia, seguit deels tres tipus d'estudis s'utilitzen per prescriure una teràpia òptima.
Anàlisi qualitativa de la reacció en cadena de la polimerasa
Una anàlisi és obligatòria per a tothom que tingui un ELISA que hagi detectat anticossos contra el VHC. La PCR qualitativa per a l'hepatitis C és la prova de susceptibilitat estàndard. El mètode només està dirigit a la detecció, no es realitza cap recompte ni aïllament d' altres substàncies.
Per detectar anticossos, s'utilitzen sistemes de prova especials amb un llindar de sensibilitat d'almenys 50 UI/ml. Si es detecten anticossos, es prescriuen altres proves aclaridores. Si el resultat és negatiu, no es faran més proves.
En alguns casos, un resultat fals negatiu pot ser degut a personal de laboratori incompetent o reactius de mala qualitat. Per a l'assegurança, és millor tornar a fer l'anàlisi en un altre lloc.
PCR quantitativa
El mètode s'utilitza per estudiar directament el nombre de flavivirus en un cicle de reacció. Per a una mesura precisa, s'utilitzen fragments d'ADN utilitzats per a la hibridació o cebadors marcats amb fluorescència. Hi ha una opció de detecció econòmica amb el colorant verd SYBL. El colorant s'encalla en un petit solc de l'ADN i es torna blau quan s'irradia amb un làser.
La concentració ve determinada per l'aparell-amplificador en equivalent digital. Els valors poden variar lleugerament entre els laboratoris i, per tant, s'han de comparar amb els valors de referència.
PCR quantitativaL'hepatitis C ajuda a triar la dosi òptima de fàrmacs i determinar la durada de la teràpia. La freqüència de l'estudi depèn de l'estadi de la mal altia, el tipus de genotip i el curs de tractament prescrit.
Determinació del genotip
El virus de l'hepatitis C té una estructura genètica variable. Nombroses modificacions fan impossible crear una vacuna i també compliquen la teràpia. S'han identificat i registrat un total d'11 genotips i 100 subtipus. Als països de l'antiga URSS, en persones infectades amb hepatitis C, la PCR detecta principalment els genotips 1b i 3.
En presència de qualsevol dels genotips, la cirrosi o el càncer de fetge poden patir. Per això és tan important detectar el virus a temps.
Per a alguns pacients, certs fàrmacs dissenyats per combatre el VHC són tòxics. El genotipat us permet determinar el tipus de proteïna i prescriure un medicament eficaç.
Als resultats de les proves de mecanografia hi ha un número amb una lletra llatina minúscula que indica el genotip del virus. Si es detecta el VHC però no s'escriu, això significa que la persona té un genotip que no és típic d'una àrea geogràfica determinada.
Resultats de l'anàlisi
El metge s'ocupa de desxifrar els resultats. Només les dades de diversos estudis (juntament amb l'anamnesi i l'examen) poden donar una imatge real general de la història clínica.
- En una persona sana, una prova d'una reacció qualitativa en el biomaterial no detecta res. Si s'indica el valor "detectat", es confirma la infecció i el pacientnecessita un diagnòstic posterior seguit d'un tractament.
- La determinació del nombre d'agents infecciosos permet avaluar la càrrega viral a l'organisme. Normalment, la PCR quantitativa de l'hepatitis C no detecta el patogen. Un indicador de fins a 810^5 es considera una càrrega baixa i, amb una teràpia adequada, garanteix un resultat favorable. Els valors més alts requereixen un examen profund i la determinació de la teràpia a llarg termini, del resultat positiu de la qual ningú no pot garantir.
- Els resultats positius del genotipat indiquen quin genotip es reconeix. Un resultat negatiu indica l'absència d'un flavivirus o la presència d'un genotip que no és típic d'aquesta regió.
Què indica una prova de PCR positiva
Qualsevol mal altia greu requereix un diagnòstic complet. Una PCR positiva d'hepatitis C confirma el diagnòstic, però només es poden fer prediccions després d'estudis de laboratori i instrumentals addicionals.
La detecció d'un virus no dóna una imatge completa de la patologia. Cal identificar el seu tipus i naturalesa, per determinar com afecta el fetge i altres òrgans. La detecció precoç del VHC sovint té un resultat terapèutic favorable.
PCR negativa amb ELISA positiu
Quan s'observen els símptomes característics del dany hepàtic, hi ha una alta probabilitat que la infecció ja hagi entrat al cos. Per tant, heu de posar-vos en contacte amb un hepatòleg o un especialista en mal alties infeccioses. Durant les entrevistes, l'especialista recollirà una anamnesi i prescriurà l'examen necessari.
Siels resultats dels estudis sobre l'hepatitis C PCR són negatius, i l'immunoassaig enzimàtic és positiu, això indica la presència d'anticossos contra el flavivirus a la sang. Això sol passar quan la infecció entra al cos en una petita quantitat, de manera que el sistema immunitari s'hi va enfrontar per si mateix. Però aquestes persones encara es consideren infectades i han de ser examinades cada 6 mesos. Si, amb aquests resultats de la prova, a una persona se li denega un examen mèdic gratuït, és millor fer-se una PCR per un preu per mantenir la salut i, si els resultats són positius, contactar amb un especialista per al diagnòstic i el tractament.
Avantatges i desavantatges del mètode
A l'hora d'establir el diagnòstic d'hepatitis C, la PCR té diversos avantatges:
- Detecció precoç del patogen.
- Definició precisa del virus.
- Eficiència del diagnòstic.
- Taxa d'error mínima.
- Alta sensibilitat.
Inconvenients del mètode:
- Alt cost de l'anàlisi. La prova requereix equips costosos, reactius i personal mèdic altament qualificat. Tot plegat suma una quantitat considerable.
- Requisits estrictes per al transport de biomaterial.
Tractament de la inflamació del fetge
L'anàlisi PCR del virus de l'hepatitis C es considera fonamental per al diagnòstic, però no és definitiu. Perquè la teràpia sigui eficaç, calen una sèrie d'estudis instrumentals i de laboratori addicionals. Després de passar totmesures diagnòstiques que el metge prescriu el tractament:
- Es prescriu la Dieta 5.
- L'alcohol està totalment exclòs.
- Recepció conjunta d'interferó i ribavirina durant 25 dies.
- Curs d'hepaprotectors "Essentiale", "Karsil", "Phosphogliv".
- En casos especials, s'utilitza la plasmafèresi discreta.
Els medicaments prescrits per un hepatòleg s'utilitzen regularment, sense canviar la dosi. La durada de la presa de medicaments la determina el metge després de passar les proves de control. Després de completar el curs de la teràpia, heu de visitar el metge cada sis mesos.
El PCR-diagnòstic permet identificar l'agent causant de l'hepatitis C en una fase inicial. Això contribueix a l'eficàcia de la teràpia i a la prevenció de la transició de la mal altia a formes tan perilloses com la cirrosi i el carcinoma hepatocel·lular.
