Recentment, s'ha desenvolupat un mètode fiable, molt sensible i ràpid per diagnosticar diverses mal alties infeccioses humanes. Aquest mètode s'anomena "anàlisi PCR". Què és, quina és la seva essència, quins microorganismes pot revelar i com prendre'l correctament, ho explicarem al nostre article.
Historial de descobriments
Va inventar el mètode de reacció en cadena de la polimerasa (PCR) pel científic nord-americà Kary Mullis l'any 1983. Inicialment, el mètode de diagnòstic va ser patentat per la Cetus Corporation, en la qual va treballar el seu creador. Però el 1992, tots els drets i patents es van vendre a Hoffman-La Roche. Després d'això, va resultar que es van realitzar estudis similars en paral·lel i van ser registrats per altres biòlegs nord-americans, com Alice Chen, David Edgar, John Trell. El 1980, els científics soviètics A. Slyusarenko, A. Kaledin i S. Gorodetsky també van tractar aquest problema. Per tant, era impossible determinar l'únic titular dels drets d'autor. Molts bioquímics destacats han fet una certa contribució al desenvolupament de la tècnica de la reacció en cadena de la polimerasa i han patentat les seves innovacions. En l'actualitat, l'anàlisiLa PCR es realitza a tot arreu en laboratoris especialment equipats.
L'essència del mètode de diagnòstic PCR
Anàlisi PCR: què és i com funciona? L'essència del mètode és augmentar el volum d'un determinat entorn microbià en condicions artificials mitjançant un enzim especial d'ADN polimerasa. Per a això, el material d'ADN existent es multiplica moltes vegades. Així, en presència d'un microorganisme patògen a la mostra, la seva quantitat augmentarà a causa de les manipulacions del laboratori bioquímic i no serà difícil detectar el bacteri al microscopi.
Com es fa la recerca de materials?
Requerit per a l'anàlisi:
- matriu d'ADN;
- primers que connecten els extrems d'una peça de material;
- enzim ADN polimerasa resistent a la calor;
- substàncies químiques que fan que els enzims funcionin correctament;
- solució tampó necessària per crear les condicions adequades per al creixement i desenvolupament del material d'ADN.
Per realitzar la PCR, es fan entre 25 i 30 repeticions, que consta de tres etapes: desnaturalització, recuit i elongació.
Per a l'anàlisi de la reacció en cadena del polímer, s'utilitza un dispositiu especial: un amplificador. Els equips moderns us permeten configurar el programa necessari per a tubs de calefacció i refrigeració per eliminar errors durant el diagnòstic.
On s'utilitza el diagnòstic?
El mètode de reacció en cadena del polímer s'utilitza en diversos camps de la medicina:
- criminalistes ambidentifica material genètic com ara cabell, saliva o sang;
- La prova de sang PCR ajuda amb el genotipat, per exemple, per detectar una reacció genèticament inherent individual a un determinat fàrmac;
- utilitzar aquest mètode per establir la presència de vincles familiars entre persones;
- El mètode PCR més popular s'ha convertit en el diagnòstic mèdic per determinar diverses mal alties infeccioses.
Quines infeccions detecta la PCR?
Per tant, la medicina ha utilitzat durant molt de temps i amb èxit l'anàlisi de PCR. Què és, ja ho sabem. I quins patògens es poden detectar amb ell? Les següents mal alties infeccioses es diagnostiquen mitjançant el mètode PCR:
- hepatitis A, B, C;
- ureaplasmosi;
- candidiasi;
- clamídia;
- micoplasmosi;
- gardnerel·losi;
- mononucleosi infecciosa;
- tricomoniosi;
- infecció per virus del papil·loma;
- tuberculosi;
- infecció per herpes tipus 1 i 2;
- helicobacteriosi;
- citomegalovirus;
- diftèria;
- salmonelosi;
- Infecció pel VIH.
A més, els mètodes de PCR s'utilitzen en el diagnòstic del càncer.
Avantatges del mètode
El diagnòstic de PCR té diversos avantatges:
- Alta sensibilitat. Fins i tot en presència d'unes poques molècules d'ADN de microorganismes, l'anàlisi per PCR determina la presència d'infecció. El mètode ajudarà amb mal alties cròniques i latents. Sovint, en aquests casos, el microorganismed' altra manera és incultable.
- Qualsevol material és adequat per a la investigació, com ara saliva, sang, secrecions genitals, cabell, cèl·lules epitelials. El més habitual és l'anàlisi de sang i frotis urogenital per a PCR.
- No cal retallar a llarg termini. El procés de diagnòstic automatitzat us permet obtenir els resultats de l'estudi després de 4-5 hores.
- El mètode és gairebé 100% fiable. Només s'han registrat casos aïllats de resultats falsos negatius.
- La capacitat d'identificar diversos tipus de patògens a partir d'una sola mostra de material. Això no només accelera el procés de diagnòstic de la mal altia, sinó que també redueix significativament els costos del material. Sovint, el metge prescriu una anàlisi PCR completa. El preu de l'examen, que consisteix en la determinació de sis patògens, és d'uns 1.500 rubles.
Recomanacions per preparar-se per a l'anàlisi
Per tal que els resultats siguin fiables durant l'estudi de PCR, cal que feu la prova, seguint les recomanacions per a la preparació preliminar per al diagnòstic:
- Abans de donar saliva, s'ha d'abstenir de menjar i prendre medicaments 4 hores abans de la presa de mostres. Immediatament abans del procediment, esbandiu-vos la boca amb aigua bullida.
- Les regles anteriors també s'han de seguir quan es pren una mostra de la superfície interna de la g alta. Després d'esbandir, es recomana fer un lleuger massatge de la pell per destacar la secreció de la glàndula.
- L'orina es recull normalment a casa. Per fer-ho, heu de fer un bany completgenitals. Recolliu 50-60 ml d'orina en un recipient de plàstic estèril. Per garantir la puresa del material, es recomana que les dones introdueixin un tampó a la vagina i que els homes estiren el plec de la pell el màxim possible. No facis donacions durant el teu període.
- Per donar esperma, t'has d'abstenir de tenir relacions sexuals durant 3 dies abans de la presa de mostres. Els metges també aconsellen no visitar la sauna i prendre un bany calent, beure alcohol i menjar picant. T'has d'abstenir d'orinar 3 hores abans de la prova.
- Per fer un frotis urogenital, per exemple, si es realitza una prova de PCR per a la clamídia, es recomana que tant les dones com els homes descansin sexualment durant 3 dies. Els fàrmacs antibacterians no s'han de prendre 2 setmanes abans de l'anàlisi. Durant una setmana, heu de deixar d'utilitzar gels íntims, ungüents, supositoris vaginals, dutxa vaginal. 3 hores abans de l'examen, s'ha d'abstenir d'orinar. Durant la menstruació, no es realitza la presa de mostres, només 3 dies després de la cessació de la secreció sanguínia, podeu fer-vos un frotis urogenital.
PCR durant l'embaràs
Durant el període d'expectativa del nadó, moltes infeccions de transmissió sexual són extremadament perilloses per al desenvolupament normal del fetus. Les ETS poden provocar retard del creixement intrauterí, avortament involuntari o part prematur, malformacions congènites del nen. Per tant, és extremadament important sotmetre's a un examen PCR al començament de l'embaràs. Cal passar l'anàlisi en el moment del registre, fins a 12 setmanes.
El material es pren del canal cervical amb un raspall especial. El procediment és indolor i no suposa cap perill per al nadó. En general, durant l'embaràs, es realitza una anàlisi per a la clamídia mitjançant el mètode PCR, així com per a ureaplasmosi, micoplasmosi, citomegalovirus, herpes, virus del papil·loma. Aquest complex d'exàmens s'anomena PCR-6.
PCR per al diagnòstic del VIH
A causa del fet que el mètode de reacció en cadena de la polimerasa és molt sensible als canvis en el cos i a les condicions del diagnòstic, molts factors poden afectar el resultat. Per tant, l'anàlisi de PCR per a la infecció pel VIH no és un mètode fiable, la seva eficiència és del 96-98%. En el 2-4% restant dels casos, la prova dóna resultats falsos positius.
Però en algunes situacions, el diagnòstic PCR del VIH és indispensable. Normalment es dóna a persones amb un resultat ELISA fals negatiu. Aquests indicadors indiquen que una persona encara no ha desenvolupat anticossos contra el virus i que no es poden detectar sense un augment múltiple del nombre. Això és exactament el que es pot aconseguir fent una anàlisi de sang PCR.
Aquests diagnòstics també són necessaris per als nens del primer any de vida nascuts d'una mare seropositiva. El mètode és l'única manera de determinar de manera fiable l'estat d'un nen.
PCR per diagnosticar l'hepatitis
El mètode de reacció en cadena de la polimerasa permet detectar l'ADN del virus de l'hepatitis A, B, C molt abans de la formació d'anticossos contra la infecció o l'aparició dels símptomes de la mal altia. L'anàlisi de PCR per a l'hepatitis C és especialment eficaç, ja que en el 85% dels casos aquesta mal altia és asimptomàtica i senseel tractament oportú entra a l'etapa crònica.
La detecció oportuna del patogen ajudarà a evitar complicacions i un tractament a llarg termini.
Examen PCR complet
Anàlisi complexa de PCR: què és? Es tracta d'un examen mitjançant el mètode de reacció en cadena polimèrica, que inclou la determinació de diversos tipus d'infeccions simultàniament: mycoplasma genitalium, mycoplasma hominis, gardnerella vaginalis, candida, trichomonas, citomegalovirus, ureaplasma urealiticum, herpes tipus 1 i 2, papilomavirus. El preu d'aquests diagnòstics oscil·la entre els 2000 i els 3500 rubles. segons la clínica, els materials i equipaments utilitzats, així com el tipus d'anàlisi: qualitativa o quantitativa. Què és necessari en el vostre cas, el metge decidirà. En alguns casos, n'hi ha prou amb determinar la presència del patogen, en altres, per exemple, amb la infecció pel VIH, un títol quantitatiu té un paper important. Quan es diagnostica tots els patògens anteriors, l'examen s'anomena "anàlisi PCR-12".
Transcripció dels resultats de l'anàlisi
Desxifrar l'anàlisi de PCR no és difícil. Només hi ha 2 escales de l'indicador: "resultat positiu" i "resultat negatiu". Quan es detecta un patogen, els metges poden confirmar la presència de la mal altia amb un 99% de certesa i començar a tractar el pacient. Amb un mètode quantitatiu per determinar la infecció, la columna corresponent indicarà l'indicador numèric dels bacteris detectats. Només un metge pot determinar l'extensió de la mal altia i prescriure el tractament necessari.
En alguns casos, per exemple, quan es determina la infecció pel VIH per PCR, amb un resultat negatiu, es fa necessari realitzar exàmens addicionals per confirmar els indicadors obtinguts.
On fer la prova?
On fer una prova de PCR: en una clínica pública o en un laboratori privat? Malauradament, a les institucions mèdiques municipals, els equips i els mètodes sovint estan obsolets. Per tant, és millor donar preferència als laboratoris privats amb equipament modern i personal altament qualificat. A més, en una clínica privada, obtindreu resultats molt més ràpid.
A Moscou, molts laboratoris privats ofereixen anàlisis de PCR per a diverses infeccions. Per exemple, a clíniques com Vita, Complex Clinic, Happy Family, Uro-Pro, es realitza l'anàlisi de PCR. El preu de l'examen és de 200 rubles. per identificar un patogen.
Es pot concloure que el diagnòstic de mal alties infeccioses per PCR en la majoria dels casos és una forma ràpida i fiable de detectar el patogen a l'organisme en les primeres etapes de la infecció. Però encara, en determinats casos, val la pena triar altres mètodes de diagnòstic. Només un especialista pot determinar la necessitat d'aquest estudi. Desxifrar l'anàlisi PCR també requereix un enfocament professional. Seguiu els consells del vostre metge i no feu proves que no necessiteu.
